酶标仪的分类
光是电磁波,波长100nm~400nm称为紫外光,人们之所以能够看到色彩,是因为光照射到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色,是因为植物吸收的大部分为红橙光和蓝紫光,但对绿色不吸收,反射出来,所以植物呈现为绿色。酶标仪测定的原理是在特定波长下,检测被测物的吸光值。
随着检测方式的发展,拥有多种检测模式的单体台式酶标仪叫做多功能酶标仪,可检测吸光度(Abs)、荧光强度(FI)、时间分辨荧光(TRF)、荧光偏振(FP)、和化学发光(Lum)。
酶标仪从原理上可以分为光栅型酶标仪和滤光片型酶标仪。光栅型酶标仪可以截取光源波长范围内的任意波长,而滤光片型酶标仪则根据选配的滤光片,只能截取特定波长进行检测。
酶标仪的发展
在单通道酶标仪的基础上又发展了多通道酶标仪,此类酶标仪一般都是自动化型的。它设有多个光束和多个光电检测器,如 12个通道的仪器设有 12条光束或 12个光源,12个检测器和12个放大器,在X方向的机械驱动装置的作用下,样品12个为一排被检测.多通道酶标仪的检测速度快,但其结构较复杂价格也较高。
酶标仪的常见故障及排除
测量的吸收值与目测结果相差很大或偏低
出现这种情况是由于滤光片参数错误,测量滤光片没有正确的进入光路,测量光的波长与正确测量光的波长相差大致使结果失真。由于电源或其它原因,有时会造成仪器存储的滤光片参数丢失或错误。此时应进行检查并重置参数。
负压取样部分故障分为几种情况:(1)取样泵自身故障;(2)流路堵塞(较易处理);(3)真空传感器监测失败。仪器安装时配有一台进口弹片式真空取样泵,使用一段时间后计算机显示负压不足。经过检查,认为是真空取样泵长期使用后磨损严重,不能产生必需的负压。这种故障难以对取样泵进行维修,一般两种办法:一是购买原厂的取样泵,价格很高且供货周期太长,影响工作。二是寻找替代品。
如何使用MK3酶标仪测吸光度
1.将实验待测样品分装到多孔板上。96孔板推荐每孔100ul -200ul体积,384孔板推荐每孔50ul-80ul体积为宜。如因实验需要,同一块多孔板上不同孔的样品体积无法保持一致,需选用带光程矫正功能的酶标仪,将光程矫正到统一的数值,例如Molecular Devices品牌的酶标仪。
2.打开仪器 的微孔板舱门,将多孔板放置入仪器内并关上舱门。
3.打开仪器软件,在实验参数设置界面选择ABS功能。根据实验目的可选择不同的检测模式(Reader Type),包括终点法(Endpoint)、动力学法(Kinetic)、孔域扫描(Well Scan)和光谱扫描(Spectrum)。
4.设置波长,版型,然后读板,得到数据。