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湖北原位杂交技术服务至上「贝科新肽」变三女主角
2023-11-25 20:42  浏览:56
4分钟前 湖北原位杂交技术服务至上「贝科新肽」[贝科新肽a5f8c59]内容:FISH是原位杂交技术大家族中的一员,因其所用探针被荧光物质标记(间接或直接)而得名,该方法在80年代末 被发明,现已从实验室逐步进入临床诊断领域。基本原理是荧光标记的核酸探针在变性后与已变性的靶核酸在退火 温度下复性;通过荧光显微镜观察荧光信号可在不改变被分析对象(即维持其原位)的前提下对靶核酸进行分析。DNA荧光标记探针是其中常用的一类核酸探针。利用此探针可对组织、细胞或染色体中的DNA进行染色体及基因水平 的分析。荧光标记探针不对环境构成污染,灵敏度能得到保障,可进行多色观察分析,因而可同时使用多个探针,缩 短因单个探针分开使用导致的周期过程和技术障碍。

原位杂交(In situ hybridazation)

固定

收集斑马鱼的胚胎,在Holfretor水中培养,到达所需要的发育时期时,用蛋白酶去除卵膜,用4%多聚甲醛固定,在4℃保存,二十四小时后用50%2%多聚甲醛溶液洗,然后换成,在-20C 保存,待用(两天和两天以上的胚胎需要用处理,去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培养,可阻断色素的形成)

原位杂交第二天

1.

1)将探针回收,放于-20C保存(通常探针可重复使用十次左右)。

2)加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升,60℃,放置30分钟,重复一次。

3)置换2XSSCT1ml,60℃,放置15分钟。

4)置换0.2XSSCT1ml,60℃,放置30分钟,重复一次。

2.

1)用MABT洗两次,每次五分钟,放在摇床轻轻摇动。

2)室温下加1ml 1:2:7溶液,时间为一小时。

3)按1:3000的比例在1:2:7溶液中加入酶连,4C 冰箱过夜。

生物领域应用原位杂交技术的例子:

物种进化与系统发生学研究:在物种进化与系统发生学研究中,原位杂交技术可以用于检测物种之间的亲缘关系和进化历程。例如,可以比较不同物种之间特定基因序列的差异,进而研究它们的亲缘关系和进化历程。

原位杂交技术在基因表达和调控、细胞分化与发育、研究和物种进化与系统发生学等领域都有广泛的应用价值,为深入探究生命现象、促进生物技术的发展提供了有力的技术支持。

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