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2023-10-11 11:47  浏览:52
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大鼠脑缺血再灌注模型

造模方法

大鼠麻zui仰卧固定于恒温手术台上。暴露颈总动脉颈(CCA),分离颈内动脉(ICA)和颈外动脉(ECA)。例如日本人找到的大白鼠原发性就是研究人类原发性的理想模型,老母猪自发性冠状动脉粥样硬化是研究人类的理想模型。CCA近心端结扎并另备线,ICA远端放置微型动脉夹,在CCA靠近分叉处插入鱼线,即线栓由颈内动脉分叉处计长度为1.85±0.05cm,说明丝线头端己到达ICA分支MCA以和大脑前动脉(ACA)的分叉处,阻断了同侧ICA和经ACA来自对侧ICA的血供,缺血1h。

手术造模图片

病理判定图片

动物实验的管理

在建设中要充分的、尽可能的直接体现管理规范,充分考虑人为原因或可能的人为失误、尽量避免人为出现可能因素的存在;在管理上要尽可能避免设施的不足或缺陷和可能出现的漏洞,使设施可能的规范管理或充分发挥设施潜在的可进行的规范管理。

一般是指为了医学上的目的用动物进行的实验。此时,动物将作为人体的代替者或模型来使用,而对构造上、机能上所表现的种间异同问题,应从比较生物学方面去了解。方法SD大鼠30只,采用随机数字表法随机分成5组每组6只:正常对照组(Control组),生理盐水组(NS组),尼古J3mg。一般的条件要求是接近于人、容易管理和能够大量使用的,因此多用哺乳类的兔、大黑鼠、小白鼠、豚鼠、猫、狗、猴、田鼠等;

实验动物各种体液、的采集方法

消化液的采集

(一) 唾液

1. 直接抽取法 在急性实验中, 可用吸管直接插入动物口腔或唾液腺导管抽吸唾液,此法非常简单,但从口腔抽吸唾液会有杂质混入。

2. 制造腮腺瘘法 在慢性实验中,收集狗的唾液,要用手术方法将腮腺导管开口移向体外,即以腮腺导管为中心,切成一直径约2~3cm的圆形粘膜片,将此粘膜片,与周围组织分开,穿过皮肤切口引到颊外,将带有导管开口的粘膜片与周围的皮肤缝合,腮腺分泌的唾液就流出颊外。这种方法可以收集到较纯净的唾液。此时,动物将作为人体的代替者或模型来使用,而对构造上、机能上所表现的种间异同问题,应从比较生物学方面去了解。

(二)胃液

1. 直接收集胃液法 急性实验时,先将动物,将插胃管经口插入胃内,在灌胃管的出口连一,用此可收集到胃液,此法适用于狗等大型动物。如是大鼠,需手术剖腹,从幽门端向胃内插入一塑料管,再由口腔经食道将一塑料管插入前胃,用pH7.5、35℃左右的生理盐水,以12ml/h的流速灌胃,收集流出液,进行分析。不过,该模型由于fu制周期长,饲料配制复杂,花费大,现已少见有单用此方法造模者。

2. 制备胃瘘法 在慢性实验中,收集胃液多用胃瘘法,如全胃瘘法、巴氏小胃瘘法、海氏小胃瘘法等。制备小胃是将动物的胃分离出一小部分,缝合起来形成小胃,主胃与小胃互不相通,主胃进行正常消化,从小胃可收集到纯净的胃液。该饲料用酪蛋白或大豆作为蛋白来源,另加蔗糖、猪油、维生素粉、盐和定量的L-胱酸而组成。应用该法,可以待动物恢复健康后,在动物清醒状态下反复采集胃液。

(三)胰液和胆汁

在动物实验中,主要是通过对胰总管和胆总管的插管而获得胰液或胆汁。狗的胰总管开口于十二指肠降部,在紧靠肠壁处切开胰管,结扎固定并与导管相连,即可见无色的胰液流入导管。造模后4d,以TUNEL法检测大鼠视网mo和视神经细胞凋亡,造模后7d,RT-PCR、Western-blot检测视wang膜和视神经节细胞组织Caspase-3、BCL-2基因和蛋白表达。大鼠的胰管与胆管汇集于一个总管,在其入肠处插管固定,并在近肝门处结扎和另行插管,可分别收集到胰液和胆汁。

有时也可通过制备胰瘘和胆囊瘘来获得胰液和胆汁。

血管钙化大鼠模型

方法:将16只雄性SD大鼠随机分为正常组和钙化组,每组8只,4周后取材检测血管钙化程度,用钙离子测试盒、碱性磷酸酶(ALP)试剂盒测定大鼠主动脉钙含量和ALP活性,用放she免yi法检测大鼠血浆和主动脉组织salusin-a含量结果与对照组比较,钙化组大鼠主动脉中膜弹性纤维间可见钙盐沉积,血浆和主动脉组织中ALP、钙含量明显升高(P < 0.01),salusin-a的表达明显降低(P <0.01).结论血管钙化大鼠模型salusin-a的表达下调.

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