市场资讯
铜川pcr实验室即时留言「多图」仌怎么读音
2023-10-02 01:12  浏览:27
1分钟前 铜川pcr实验室即时留言「多图」[英瀚斯2eefa30]内容:

分子生物学服务

公司建有100平米分子实验室,配备有PCR仪、定量PCR仪、电泳仪、恒温培养箱、恒温摇床、垂直电泳仪、蛋白转印仪、蛋白发光成像仪等设备。分子组技术人员毕业于中国农业大学、华中科技大学同济医学院、浙江理工大学等高校生物医学相关,全部具有硕士研究生以上学历,熟练掌握分子生物学相关实验,可开展多种分子生物学检测服务。报告:根据证实为大肠阳性的管数,查MPN表,报告每100ml(g)大肠菌群的MPN值。

分子实验室部分设备

RNA提取

1.弃去培养液,用PBS清洗两次1-2。

2.弃去PBS,用1000u1吸干净残余PBS。

3.加1ml TRIZOL研磨B 41。

4. 1.5mIEP管标号与每孔相对应备用。

5.研磨好的溶液转移至对应的 EP管中国。

6.往每个EP管中加入250ul,剧烈震荡30s, 冰上静置12min[问l。

7. 所有样品4C离心,转速: 13500转1分钟,时间: 15min.

8. 再次标记一批同样编号EP管。

9.离心后吸上清液400u1移入相应编号的EP管中,再加入400ul异充

分混匀。4C冰箱35min。

10. 4C离心,转速: 13500转1分钟,时间: 10min.

11.弃去.上清液,加1m175%乙醇,轻摇7]。

12. 4C离心,10600转/分钟,时间: 5min.

13. 弃上清液滤纸吸干。

14. 加DEPC水10ul溶解,-80C保存。进行逆转录前测浓度。

组织RNA提取

1、剪米粒大小组织块放入EP管中标号。

2、EP管中加300ul trizol浸泡30分钟或更久。

3、用研磨棒研磨,以肉眼很难看到组织为宜。

4、加700u1 trizol静 置5分钟。

RNA提取处理的步骤如下:

在玻璃烧杯中注入去离子水,加入DEPC使其终浓度为0.05%~0.1%(DEPC-H2O)。(DEPC二焦碳酸酯为活性很强的物,须在通风橱中小心使用)

将待处理的塑料制品放入一个可以高温灭菌的容器中,注入DEPC-H2O,使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中,在通风柜中37℃ 或室温下处理过夜。

将DEPC-H2O小心倒入废液瓶中,将装有DEPC- H2O 处理过的塑料制品的容器以铝箔封口,高温高压蒸汽灭菌至少30分钟。

灭菌塑料制品烘烤干燥,置洁净处备用。

玻璃和金属物品250 ℃烘烤3小时以上。

◆ HPLC

如果合成的寡核苷酸应用于,定向诱变或定量的基因探测,那么对其纯度要求较高。脱盐或OPC纯化的寡核苷酸可能达不到要求,则HPLC纯化被广泛地用于这个目的。作为一种纯化树脂,阴离子交换树脂或反向树脂被用于寡核苷酸纯化。阴离子交换树脂的HPLC通常显示95-98%纯化效率,对于达到35-mer寡核苷酸的纯化是充分的。反向树脂化的HPLC与阴离子交换树脂的HPLC呈现相似的纯化效率。因为HPLC的纯化效率很大程度依靠寡核苷酸的长度,用HPLC法不能有效纯化长的寡核苷酸(大于35-mer)。,温度升高会使蛋白质变性失活,因此,基于这一点考虑提取蛋白质和酶时一般采用低温(5度以下)操作。

◆ PAGE

对于长的寡核苷酸的纯化(50-100mer),我们推荐PAGE纯化法,它使用交连的聚酰胺凝胶(电泳)作为纯化基质。尽管PAGE显示出高的纯化效率(>98%),但它在额外的步骤方面有一些缺陷,比如在PAGE之后需要提取和脱盐,继而将导致纯化产率的下降。如今有多家公司推出了外显子组捕获试剂,包括罗氏NimbleGen、安捷伦、Illumina,还有现在的华大基因。

发表评论
0评